Для изучения локальных эффектов среды синтезированы pH-чувствительные тиол-специфичные спиновые метки. На модельных протеинах методами спектроскопии циркулярного дихроизма установлено, что введение спиновой метки в молекулу белка не нарушает ее пространственной структуры. Методами ЭПР-спектроскопии в высоких магнитных полях (рис.1) получена информация о локальных электростатических эффектах, а также разделены эффекты полярности и pH-среды. Найдены локальные значения pH и изучено взаимодействие синтезированных радикалов с модельной мембраной пептида P11, являющегося фрагментом участка 925—933 цепи B1 мембран-специфичного гликопротеина ламинина. Результаты важны для изучения функций отдельных участков мембран и других клеточных структур, а также мембранного транспорта.
 Рис. 1. Спектр ЭПР изо-цитохрома С при рН = 6,5 (темная линия) и при pH = 2,5 (светлая линия), меченого по аминокислотному остатку Cys 102 меткой IMTSSL.
|
